99cybermonday超速離心機售後維修,超速密度梯度離心法

超速密度梯度離心是一種離心分離技術,它基於(yu) 樣品中不同成分的密度差異,利用製備的稠密的介質溶液在離心管內(nei) 形成連續或不連續的密度梯度。當樣品在高速旋轉的離心機中受到離心力作用時,不同密度的成分會(hui) 沉降到不同位置,從(cong) 而實現分離。

在超速密度梯度離心中,常用的介質包括氯化銫、蔗糖和多聚蔗糖等。這些介質的主要作用是形成密度梯度,並通過防止液體(ti) 介質對流混合來確保分離後的各區帶不會(hui) 損壞。

要實現超速密度梯度離心,超速離心機是必不可少的。Eppendorf 目前提供落地款 CP-NX 係列超速離心機和 CS(F)NX 微型超速離心機,均可用於(yu) 實現高效的密度梯度離心實驗,助力優(you) 質產(chan) 物純化。

超速密度梯度離心法可分為(wei) “速率區帶離心法”和“等密度梯度離心法”兩(liang) 種。

速率區帶離心是指顆粒在離心力的作用下,以不同的速度向管底沉降,最終形成區帶的方法,其分離的方法學原理主要基於(yu) 樣本和雜質之間的大小和形狀差異;等密度梯度離心法則是利用離心力和浮力達到平衡的原理,使顆粒在與(yu) 其密度相等的介質中達到等密度區帶,其依據的分離方法學原理是樣本和雜質之間密度的差異。

▲速率區帶離心(左)和等密度梯度離心(右)

比如大家所熟知的“DNA半保留複製”,便是通過等密度梯度離心法被發現的。

1958年,美國科學家Matthew Meselson和Franklin Stahl進行了一項關鍵性的實驗。首先,他們利用含15N的NH4Cl作為唯一碳源的培養基來培養大腸埃希菌,使其DNA分子中富含15N同位素。經過連續培養若幹代後,大腸埃希菌的DNA就被充分標記了15N。
然後,科學家們將這些標記了15N的大腸埃希菌轉移到普通培養基(含14N氮源)中繼續培養。在複製過程中,新合成的DNA鏈會包含14N,而原始鏈則保留15N。
培養完畢進行等密度梯度離心,由於不同密度的DNA分子被同位素進行了標記,因此會根據其密度的差異在梯度介質中沉降到不同的位置。

由於(yu) DNA半保留複製的特性,新合成的DNA分子會(hui) 包含一條原始鏈和一條新合成的鏈,

因此,子一代的DNA分子將是一條15N鏈和一條14N鏈的雜合分子,密度介於(yu) 純15N-DNA和純14N-DNA之間。

這樣的複製第一代與(yu) 完全由新鏈組成的DNA分子(第二代)在密度上會(hui) 有所不同。因此,在等密度梯度離心後,這些不同密度的DNA分子會(hui) 在離心管中形成不同的區帶。

這種方法的成功應用,不僅(jin) 證實了DNA的半保留複製方式,也為(wei) 後續的DNA複製機製研究提供了重要的實驗基礎。

整體(ti) 而言,密度梯度離心法廣泛應用於(yu) 生物化學、分子生物學、細胞生物學等領域,可以分離和純化細胞、病毒、蛋白質、核酸等生物大分子。

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