99cybermonday超速離心機外泌體分離方法大PK，選對方法事99cybermondayhimac離心機官網

近年來，Science、Nature、JEV 等各大期刊上高頻出現的方向之一，正是外泌體(ti) 。

外泌體是什麽？

外泌體(ti) （exosome）是由細胞內(nei) 多泡體(ti) 與(yu) 細胞膜融合後，釋放到細胞外基質中的納米級囊泡。其內(nei) 部可以包裹攜帶 RNA、DNA、蛋白質、脂質等多種信號分子，表麵膜上還有豐(feng) 富的抗原表達，可以通過循環係統到達其他細胞與(yu) 組織，參與(yu) 細胞間通訊，是一種新型的細胞間信號傳(chuan) 遞的媒介。

外泌體(ti) 起源於(yu) 質膜循環途徑中的膜腔或早期胞內(nei) 體(ti) ，這些膜腔或早期胞內(nei) 體(ti) 會(hui) 向內(nei) 凹陷形成管腔內(nei) 膜泡（ILV），進一步發展成為(wei) 多泡小體(ti) （MVB）完成包裝過程，多泡小體(ti) 最後在細胞內(nei) 分子馬達的牽引下與(yu) 細胞表麵融合，最終被分泌出去。

外泌體可以用來做什麽？

目前已發現外泌體(ti) 在腫瘤轉移、免疫調控機製、阿茲(zi) 海默症和免疫疾病等疑難雜症的治療方麵嶄露頭角，有望成為(wei) 多種疾病的早期診斷標誌物。

作為(wei) 人體(ti) 內(nei) 的一類重要囊泡，外泌體(ti) 自 2013 年起逐步成為(wei) 科研熱點。以藥物遞送為(wei) 例，由於(yu) 外泌體(ti) 所固有的長期循環能力和出色的生物相容性以及諸多優(you) 點（見下圖），使得其具有很大的潛力成為(wei) 藥物遞送載體(ti) ，適合於(yu) 遞送各種化學物質、蛋白質、核酸和基因治療劑。

外泌體(ti) 作為(wei) 治療性納米載體(ti) 的優(you) 勢[2]

外泌體怎麽提取？

獲得高純度的外泌體(ti) 是開展後續研究的基礎。目前分離外泌體(ti) 的方式有許多種，如：

▲ 色譜法

▲ 超濾法

▲ 多聚物沉澱法

▲ 磁珠免疫法等

但超速離心法仍舊是業(ye) 內(nei) 推崇的外泌體(ti) 分離金標準，這是因為(wei) 超速離心法可以準確地重複獲取外泌體(ti) ，同時最大限度減少蛋白質聚集體(ti) 和雜質離子的共純化現象。

如果選擇超速離心法，那麽(me) 可以依托99cybermonday超速離心機，來獲取更高純度的外泌體(ti) 。

基於(yu) 超速離心法的CP100NX 外泌體(ti) 分離方案

上麵的表格中已經提到，依托於(yu) 超速離心機的外泌體(ti) 分離方案大致有兩(liang) 種：分別是差速離心法和密度梯度離心法。

其中密度梯度離心法可以成功地將亞(ya) 細胞成分（例如過氧化物酶體(ti) ，線粒體(ti) 等）分離到密度梯度溶液中的不同層中。外泌體(ti) 粗提樣品被放置在梯度液頂部，當施加離心力時，樣品中的顆粒以特定的速率通過梯度，該梯度以從(cong) 上到下的密度增加。

樣品中的外泌體(ti) 將在 1.15-1.19 g/mL 的密度範圍富集，隨後可以通過分餾收集。密度梯度超速離心對從(cong) 蛋白質聚集體(ti) 和非膜顆粒中分離出外泌體(ti) 非常有效。在日常分離中，兩(liang) 種離心方法可以搭配使用，會(hui) 有助於(yu) 獲取更高純度的外泌體(ti) 。

分離外泌體(ti) 流程（超速離心法）

1. 收集對數生長階段的細胞培養(yang) 上清或組織液

2. 多功能台式離心機，去除死細胞、生物聚集體(ti) 和大型囊泡等

500 xg,10min；2000 xg,10min; 10,000 xg,30min, 4℃

3. CP100NX 超速離心機，差速離心法初步富集外泌體(ti)

100,000 xg, 2h, 4℃；P70AT 固定角轉

4. CP100NX 不連續密度梯度離心，進一步純化外泌體(ti) ，回收 1.15-1.19 g/ml 介質液

100,000 xg, 16h, 4℃；P32ST 水平轉子