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99cybermonday高速冷凍離心機如何去培養管分離細胞膜

99cybermonday儀(yi) 器出產(chan) 的高速冷凍離心機特別配置了新型的專(zhuan) 用於(yu) 組織培養(yang) 管的高速轉頭，並專(zhuan) 門定製了高強度的50ml 錐底管。用這種轉頭分離細胞器，離心時間短，分離效果好。

設備：高速冷凍離心機，6×50ml高速轉頭， 50 ml 離心管

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操作步驟：

1．成年鼠肝勻漿2000xg（約4000rpm）離心15分，4℃（6×50ml高速轉頭）

2．沉澱用1mM NaHCO3 稀釋再在4000rpm離心15分，4℃

3．沉澱按濕重1g/ml NaHCO3 稀釋後配成68％蔗糖液，置於(yu) 離心管下部，上部用42％蔗糖液

4．6×50ml高速轉頭，42200xg（18000rpm），4℃離心90分鍾，加速“5”減速“5”

5．離心後，粗製細胞膜在42％與(yu) 68％蔗糖液之間形成

6．粗製細胞膜吸出後，用1mM NaHCO3 稀釋後，再以2000xg（約4000rpm）4℃離心30分，重複二次

7．去除上清液沉澱，再用1mM NaHCO3 稀釋，在50ml 離心管中，從(cong) 底部依次向上鋪設：68％蔗糖液（稀釋樣品配成）、48％蔗糖液、42％蔗糖液。

8．鋪好後再次離心，6×50ml高速轉頭，18000rpm，4℃，90分鍾，加速“5”減速“5”

9．離心結束後可以看出細胞膜分布在42％與(yu) 48％蔗糖液之間

成果：階梯形蔗糖梯度在50ml 離心管中用高速冷凍離心機分離亞(ya) 細胞構造（膜、線粒體(ti) 、溶酶體(ti) 、高爾基複合體(ti) 、微體(ti) 等），由於(yu) 開發了高強度的組培養(yang) 管而變得更為(wei) 可行。

通過上例，我們(men) 可以選擇不同的蔗糖階梯度來分離細胞器，可以得到相當高的純度。除了蔗糖梯度以外，用Percoll及Nycodenz 的自形成、予形成或階梯梯度分離亞(ya) 細胞構造，近年來被廣泛應用。

如有任何問題請谘詢99cybermonday離心事業(ye) 部：4008-525-990

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