99cybermonday離心機有關新冠病毒的幾種離心方案推薦99cybermondayhimac離心機官網

99cybermonday離心機有關新冠病毒的幾種離心方案推薦

售後維修 2020-08-10 07:40:28

方案一 Percoll自形成梯度：99cybermondayP28ST轉頭（6X40ml）

單管配置：Percoll原液6.5ml，0.25M蔗糖23ml加樣品6ml，充分混合後注入40PA離心管至距管口3mm冰箱中預冷2小時後製備二管放入吊桶掛在P28ST轉頭上（其餘(yu) 4個(ge) 空吊桶也要掛上），20,000rpm，1小時，5℃ 加速8，減速8。

結果：病毒沉降在Percoll 1.06密度處。

梯度取出：1）手工取出：離心管傾(qing) 斜小角度後用定量吸管吸出，13ml PET離心管分別收集26管（每管0.5ml），PA管分別收集21管（每管0.5ml），各管分別測OD給出OD→離心管管容量曲線,可以看到病毒峰,確定離心管編號後即可移出,蔗糖可通過透析除去.2)儀(yi) 器收集:用99cybermonday DGF-U梯度形成一收集儀(yi) ,每次做一個(ge) 管子,DGF-U後出口接流動池的分光光度計，連續測OD並繪出曲線後分部收集,根據病毒峰的位置,可以確定病毒集中在哪些離心管中,透析後得到較純病毒液.

99cybermonday離心機病毒離心方案

方案二蔗糖階梯梯度

單管配置：用0.01M Tris-Hcl配置蔗糖梯度，離心管下部為(wei) 45%（W/W）（PET管為(wei) 4ml，PA管為(wei) 3ml），上部為(wei) 32%（W/W）（PET管為(wei) 4ml，PA管為(wei) 3ml），表麵加樣品至距管口3mm（約為(wei) 4.5ml）。對稱雙管，38,000rpm（256,000Xg）X 1小時，5℃ 加速8，減速7。

結果：病毒沉降在二個(ge) 蔗糖梯度之間。

方案三連續蔗糖梯度：99cybermondayCPMX或WX係列離心機，P40ST轉頭13PET管或13PA管。

單管配置：

1）13PET管：20%-50%（W/W）連續蔗糖梯度。

用0.01M Tris-Hcl配置蔗糖梯度：用20%，25%，30%，35%，40%，45%，50%（W/W）蔗糖液各1.5ml，從(cong) 離心管低部逐層向上鋪設（底部高密度），鋪二管，直立在試管架上室溫過夜，第二天早晨放入冰箱僅(jin) 5℃預冷2小時。在蔗糖液上部加樣品（約2ml）至距管口3mm。對稱放入P40ST轉頭吊桶（轉頭及吊桶在冰櫃中預冷過夜）對稱雙管，38,000rpm（256,000Xg）X 1小時，5℃ 加速8，減速7。

2）13PA管：20%-50%（W/W）連續蔗糖梯度

用0.01M Tris-Hcl配置蔗糖梯度：用20%，25%，30%，35%，40%，45%，50%（W/W）蔗糖液各1.2ml，從(cong) 離心管低部逐層向上鋪設（低部高密度），鋪二管，直立在試管架上室溫過夜，第二天早晨放入冰箱5℃預冷2小時。在蔗糖液上部加樣品（約2ml）至距管口3mm。對稱放入P40ST轉頭吊桶（轉頭及吊桶在冰櫃中預冷過夜）對稱雙管，38,000rpm（256,000Xg）X 1小時，5℃ 加速8，減速7。

結果：冠狀病毒應沉降在蔗糖36%-40%之間（注意：空吊桶必須都按編號掛在轉頭上）

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